颅脑脊髓损伤自由落体打击器制作损伤模型操作流程
颅脑脊髓损伤自由落体打击器制作损伤模型操作流程
创伤性脑损伤(TBI)是指由于外部机械力的作用导致大脑的损伤,临床发病率逐年上升。为了更好的研究这些问题的发病机制,了解颅脑外伤病理生理过程,并制定出新的治疗方法,建立良好的动物模型显得至关重要。
按自制改良的自由落体方法制作大鼠重型颅脑损伤模型。
自由落体方法:由脑立体定位仪、固定架、带孔的光滑不锈钢导管、下落砝码、撞击针、挡片组成,使用时挡片插入一定高度的不锈钢导管内,放入砝码,撞击针置于硬脑膜上,迅速拔出挡片,砝码以自由落体的速度撞击撞击头,后者直接打击硬脑膜,造成颅脑损伤模型。以下为自由落体打击器部分配件
撞击针(不同体型的鼠选相对应型号的撞击针)
砝码(不同体型的鼠选用相对重量的砝码)
自由落体支架(可选配)
脊髓打击适配器(固定鼠的脊髓)
接下来是操作流程
选用250-300g雄性SD大鼠,造模前禁食8-12h;大鼠经称重,用10%水合氯醛麻醉(0.3ml/100g)或者条件足够可以用气体麻醉进行吸入式麻醉,降低大鼠的死亡率同时保证实验的成功率。用剃毛刀理去大鼠头顶的毛发,进行备皮,碘伏常规消毒后,于矢状正中切开头皮,长约3-4cm。
剥开软组织,剥离骨外膜,暴露左侧顶骨,在冠状缝后3mm,中线旁左2.5mm处(此定位可进行调节),用高速颅骨钻钻1个小孔,并扩大为直径5mm的骨窗,暴露蛛网膜并保持硬脑膜完整。
将撞击针置于硬脑膜外,此时不放砝码,向上调节撞针2-3mm,使得用40g 砝码从20cm高处沿导管呈自由落体冲击于撞击针时(将挡片突然抽出),可以使得压缩深度是2-3mm,不打穿硬脑膜,造成局部脑挫裂伤,致使冲击力为800g/cm(40g×20cm),打击后,立即从致伤位置解除,以免二次损伤,逐层缝合头皮,用止血钳夹一下缝合的伤口,酒精棉球擦拭,取下耳杆、大鼠,肌肉注射青霉素抗感染,把动物放回饲养笼内,术后注意保温。
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